临床研究-间质细胞外泌体在组织再生和抗衰老的效果

今年9月份意大利，罗马大学感官系发表的一篇关于 “Exosomes and Signaling Nanovesicles from the Nanofiltration of Preconditioned Adipose Tissue with Skin-B® in Tissue Regeneration and Antiaging: A Clinical Study and Case Report” 的文章，阐述了脂肪间充质细胞外泌体在组织再生和抗衰老中的作用-临床研究和病例报告。

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背景

由于皮肤组织间充质干细胞的存在，以50-100微米的不同尺寸收获和加工的皮肤组织可以有效地用于疤痕。从1毫升脂肪抽吸物中，可以获得大约2.0~6.0E+7个细胞，细胞存活率为90%，从1克相同的组织中，可以分离出5E+4个间充质干细胞，

组织再生阶段是通过间充质干细胞与细胞外基质中新形成的细胞、血管、信号蛋白介导的信号以及祖细胞产生的一些再生微小RNA之间的一系列相互作用而发生的。

外泌体微泡能够向细胞传递信息，通过它们所包含的蛋白质、mRNAs和微小核糖核酸发挥治疗作用。当外泌体从成体干细胞中释放出来时，即使产生它们的细胞不存在，它们也能保持活性，激活组织再生过程。

外泌体可以通过影响组织对损伤的反应和积极地与细胞代谢相互作用来维持产生它们的成体间质细胞的功能性治疗表型。

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间质细胞外泌体诱导和激活衰老细胞的可能机制

1. 外泌体可以限制衰老表型基因的表达，并阻止MMPs的表达。可以通过降低TLR4水平来灭活TL4/NF-κB炎症级联反应；可以降低IFN-γ、TNF-α和IL-1β水平，从而减少局部炎症现象；并且可以增加TGF-β1和IL-10的表达。

2. 来源于脂肪间充质细胞外泌体在巨噬细胞中诱导一种非炎症表型M2表型，可以调节自噬。在真皮和表皮的损伤中，它们通过转移miRNA允许更快速的生理愈合，促进内皮形成，减少氧化应激损伤。

3. 脂肪间充质细胞外泌体中miRNA-126可以调节新血管生成和内皮细胞来保护细胞免受缺氧-再灌注病理的急性事件影响。它们可以恢复超氧化物歧化酶(SOD1)膜电位的连接效率，并可以通过在组织中释放α-1-抗胰蛋白酶(AAT)来抑制弹性蛋白酶，可以广泛限制组织老化现象。

4. 外泌体在其表面表达Alix蛋白，这是一种与细胞骨架相关的衔接蛋白，调节酪氨酸激酶 (TK) 和CD63的功能，通过调节发育、活化、生长在细胞中发挥基本作用。它们通过减少细胞凋亡来减少组织退化。

5. 间质细胞外泌体通过增加成纤维细胞增殖和迁移和Wnt/β-连环蛋白信号传导以及上调受体组织中的基因表达来改善伤口和疤痕。

6. 间质细胞外泌体允许增殖标记细胞的过度调节，如细胞周期蛋白D1、细胞周期蛋白D2、细胞周期蛋白A1和细胞周期蛋白A2；以及生长因子，如VEGF、PDGFA、EGF和FGF2它们刺激并激活AKT和ERK途径，导致皮肤损伤中的上皮再形成、生理胶原沉积和新血管形成显著增加。

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研究数据

病人满意度评估量表。与D0 (治疗前)、治疗后30天和90天相比，受试者通过对紧致度和皮肤缓解进行评分来评估他们的满意度。每个标准0-4分 (0分：不满意；4分：满意)。

评估缺陷严重程度和皱纹的数字等级量表 (NRS ): 10–0分，每个部位单独评分(10分：皱纹或缺陷严重程度；5分：中等皱纹迹象或中等缺陷；0分：低皱纹迹象或中等缺陷)；

用于评估稳定性、柔软性和水合作用的改良温哥华量表。使用改良的温哥华量表来评估与D0 (治疗前)相比，治疗后15天和30天皮肤外观的改善。评估的参数是稳定性、柔软度和水合作用。

ADSCa，Adult mesenchymal stem cells (MSCa) derived from adipose tissue，成人脂肪间充质干细胞

巴拉尔德斯卡量表、数字评定量表(NRS)和修正的温哥华量表(MVS)表明，该间质细胞外泌体可有效地用于治疗，包括注射到受慢性和光老化影响的靶组织中，结果良好。

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方法

表面麻醉后抽取少量脂肪组织，根据Tonnard法分解。进行20/40微米的初始微滤以去除纤维颗粒和细胞碎片。用含有透明质酸的无菌溶液稳定微滤，并立即超滤至0.20微米的最终尺寸，以排除不同分子量的细胞成分和透明质酸。然后使用显微注射的中胚层疗法技术将悬浮液注射到真皮中。

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结论

这项回顾性临床评估研究证明间质细胞外泌体治疗皮肤皱纹和面部组织皱纹的效果非常好。该方法是安全的和创新的再生疗法，作为皮肤再生疗法、抗衰老疗法和慢性炎性疾病的有效和可行的替代方案，同时外泌体缺乏由细胞碎片和纤维芽产生的炎性成分。