4个热点同时做？复旦【外泌体-cGAS-STING轴→调控巨噬细胞→影响

这是复旦大学附属中山医院团队刚发表的内容，他们聚焦于经肝动脉化疗栓塞（TAGC）治疗后的产生抵抗的免疫微环境异质性。选题上，研究直接从外泌体、cGAS-STING通路、巨噬细胞、Ferroptosis多个热点同时入手，不仅揭示了外泌体miR-32-5p在肿瘤微环境中“代谢-免疫”的双调控模式，还提出了“Ferroptosis+巨噬细胞”的协同模型，内容可太丰富了。
而思路上，研究也是结合了单细胞、转录组和实验验证的方式将各个热点串联在一起，从临床单细胞数据到构建小鼠模型验证机制，再到最后提出新的联合治疗策略，层层递进，逻辑基础都很扎实，这么好的框架自然也能打动审稿人！

 

定制生信分析
生信服务器

研究思路
1.研究先基于单细胞转录组数据分析了治疗组和疾病组之间细胞成分的变化，并利用TME和WB确定标志物变化，ROC曲线和相关性分析揭示外泌体miR-32-5p对TACE耐药的诊断状态和与巨噬细胞之间的关系。
2.分离外泌体miR-32-5p并利用染色、免疫荧光、细胞活力测定等实验揭示其抗肿瘤作用，并通过构建体内小鼠模型进行验证。
3.对miR-32进行敲除实验并分析miR-32-5p的表达变化，对BMDM和HCC共培养并利用WB、免疫荧光等实验揭示miR-32缺失对肿瘤的影响。
4.对exsomiR-32-5p处理后的巨噬细胞进行转录组分析，GSEA揭示主要富集途径，免疫荧光等实验观察关键基因的表达变化，揭示miR-32-5p功能的分子机制。随后还利用TCGA-LIHC数据分析了关键基因之间的相关性及与患者存活率之间的关系。
5.体外实验验证Ferroptosis在miR-32-5p介导的抗肿瘤活性中的关键作用。最后，研究还通过体内实验提出了一种miR-32-5p外泌体与PD-L1抑制剂联合的协同抗肿瘤策略。

主要结果展示
1.单细胞转录组结果表明外泌体miR-32-5p可能在TACE治疗后HCC微环境中作为巨噬细胞动力学的调节因子。
2.miR-32-5p通过诱导Ferroptosis调节与HCC相关的巨噬细胞存活，同时促进巨噬细胞向促炎表型重新编程。
3.miR-32-5p抑制肿瘤生长和转移，同时刺激TME中的抗肿瘤免疫反应。
4.miR-32缺失促进肿瘤细胞增殖，同时抑制巨噬细胞和CD8+ T细胞的抗肿瘤活性。
5.miR-32-5p通过磷酸化关键信号分子激活cGAS-STING途径增强抗肿瘤免疫，抑制ARID1B表达，减轻其对cGAS-STING信号的抑制作用，逆转HCC TACE耐药性。
6.miR-32-5p通过促进Ferroptosis和极化M1巨噬细胞，与PD-L1阻断能发挥协同作用，抑制肿瘤发展，延长生存期。