告别杂质与假信号！解锁外泌体可靠研究的双密钥
如今，我们认识到，外泌体几乎由所有类型的细胞分泌，广泛存在于血液、尿液等各种体液中。它携带着来源细胞的“身份信息”和“功能指令”——包括蛋白质、脂质、DNA以及各类RNA，是细胞间通讯的关键介质。在癌症领域，肿瘤细胞利用外泌体“拉帮结派”，例如通过递送特定的miRNA“驯化”巨噬细胞，帮助自己逃脱免疫监控、实现远处转移。在再生医学中，干细胞来源的外泌体则展现出促进组织修复、调节免疫的神奇能力，为心肌梗死、神经损伤等疾病的治疗带来了新希望。
从液体活检的“新秀”到药物递送的“天选之子”，外泌体在疾病诊断、治疗和预后评估方面展现出极其广阔的应用前景。
然而，外泌体研究也面临着一个根本性的挑战：如何高效、高纯度地获得这些纳米级的“信使”，并清晰、准确地追踪它们在复杂生命系统中的轨迹与功能？这个痛点，犹如一把锁，限制了我们对这颗“明星”全部潜力的解锁。
今天，就让我们一同深入探索，揭开高质量外泌体研究的神秘面纱。
01
挑战与困难：如何高纯度，高效率分离
外泌体研究当前面临的首要挑战，在于如何实现高纯度、高效率的分离与精准鉴定，而传统分离方法普遍存在明显局限：
1.超速离心法难以适用于大样本处理，实验重现性较差；聚合物沉淀法操作简便，但分离产物中杂质含量高，易对后续实验造成干扰；
2.抗体法虽特异性较强，却容易在操作过程中损伤外泌体的天然结构，同时存在非特异性结合等问题。这些痛点也让更稳定、更高效、更适合临床转化的外泌体分离与鉴定技术，成为当下科研与转化应用的关键突破口。
解决方式①：ExoIsolator Exosome Isolation K
产品特点:
1、 简单的操作：无需任何操作技巧
ExoIsolator Exosome Isolation Kit的操作过程极为简单。组装好Filter Holder和Isolation Filter进行减压过滤，再用PBS回收过滤膜表面上的外泌体即可。这种方法可以尽可能的减少外泌体的损失，而且不易产生人为操作因素上的差别。
2、 回收效率高：与超速离心法相当
目前最常用的外泌体分离方法是超速离心法，使用超速离心法和ExoIsolator Exosome Isolation Kit同时回收HEK293S细胞培养液中的外泌体，通过外泌体粒度分布、粒子数和外泌体marker的表达量检测两种方法得到的外泌体并进行比较。结果可以看出，两种方法得到的外泌体的粒度分布和粒子数基本相同，而外泌体marker的表达量的结果显示，在相同蛋白量的情况下，ExoIsolator 的外泌体标志物更高，说明ExoIsolator 比超速离心法得到的外泌体纯度更高。(专利申请中)
解决方式②：MagCapture&MassivEV系列
高纯度外泌体纯化方法-PS亲和法：
PS亲和法是FUJIFILM Wako自行研发的外泌体分离方法，利用可与外泌体表面的磷脂酰丝氨酸（PS）特异性结合的Tim4。通过PS-Tim4的高特异性结合，并配合螯合剂，可在温和的条件下，分离获得高纯度、完整的外泌体。
产品特点
● 通过新型亲和法（PS亲和法）可获得高纯度的细胞外囊泡
● 与传统的超速离心法相比，可获得更高回收量和纯度的外泌体
● 可获得完整的外泌体，应用广泛
● 磁珠操作简便，可处理多个样品
性能数据
▼ 使用NanoSight分析粒子
将利用PS亲和法、超速离心法从K562细胞培养上清中获取的外泌体分别用超纯水稀释至适当浓度，再使用 NanoSight LM10分析粒子直径和粒子浓度。
▼蛋白质组学分析胎牛血清（FBS）来源蛋白质的污染比例：
使用PS亲和法、超速离心法从K562细胞培养上清（10%去外泌体FBS 添加培养基）提取外泌体，对外泌体进行质谱分析，比较所有分析的多肽中，K562细胞来源的人多肽与污染物FBS来源多肽的比例。
02
外泌体功能研究的关键在于对其进行可靠的荧光标记与示踪，以揭示其在细胞间通讯、疾病发生发展中的动态行为。目前，最主流且应用广泛的标记方法是使用亲脂性荧光染料，如PKH系列（PKH26、PKH67）和Di系列（DiO、DiI、DiD、DiR）
但是存在明显的缺点：
1. 染色后外泌体粒径增大。
2. 荧光染料自身形成粒子，造成背景增高。
需求痛点：
标记干扰——蛋白融合标记或大分子标记可能影响外泌体本身的生物学行为，引入干扰信号。
解决方式:同仁化学ExoSparkler
总结
在给药后的背部皮肤中，给药组PKH26出现了色素沉着。
IVIS观察结果显示，外泌体皮下注射后，Lymph节点的迁移通过Mem Red可以更高敏感地检测到。
组织共聚焦观察结果显示，与PKH26类似，可以确认Mem Red染色外泌体向淋巴结内部的迁移。
冷冻切片观察结果显示，Mem Red也可以观察到被淋巴结内的细胞摄取。
